猪早期胚胎和泌尿生殖器官发育过程中WT1基因表达和组蛋白乙酰化变化的研究

【摘要】维尔姆氏瘤（Wilmstumour）或称为肾母细胞瘤，是一种儿童多见的肾脏恶性肿瘤。维尔姆氏瘤基因1（Wilmstumourgene1，WT1基因）是唯一一个与维尔姆氏瘤的发生相关的基因，而且被普遍认为是该肿瘤的抑制基因。WT1基因通过调控多个基因的表达进而影响细胞增殖与发育，对于肾脏、睾丸和卵巢的发育起到至关重要的作用，它能影响器官发生、功能维持以及多个发育相关基因表达的调控。研究发现，组蛋白乙酰化能够调控WT1基因的表达从而影响其功能的发挥。然而，在猪泌尿系统各器官发育过程中，WT1基因的表达水平以及组蛋白乙酰化对WT1基因表达调控的机制目前还不得而知，亟待进一步研究。本实验针对猪泌尿生殖器官中WT1基因的表达方式、功能以及WT1基因表达水平与总体组蛋白乙酰化程度之间的相互关系进行了研究。结果显示：1、在猪早期胚胎阶段WT1基因在GV期和MII期中高表达，在孤雌囊胚中表达量极低，在其他孤雌胚胎时期中几乎不表达；在新生仔猪和成体猪各主要器官中，WT1基因高表达于脾、肾、卵巢和睾丸中。2、丁酸钠（NaBu）处理猪肾成纤维细胞（PKF）后，PKF中WT1和组蛋白H4的表达量随着NaBu浓度的提高和处理时间的延长而上升，而且WT1和组蛋白H4在PKF中的表达位置一致。3、随着发育的进行猪肾脏、卵巢和睾丸的组织结构发生了明显的变化；此外，在E35d、E60d、新生仔猪和成体猪泌尿生殖器官中，WT1和组蛋白H4共表达于特定的组织细胞中，而且WT1高表达的组织细胞中组蛋白H4也同样高表达。综上所述，WT1基因高表达于胚胎期猪、新生仔猪和成体猪的肾脏、卵巢和睾丸中，说明WT1基因在猪泌尿生殖器官的发育、形成以及成熟后器官正常功能的维持中发挥着重要作用。此外，总体乙酰化水平的提高能有效地提高PKF中WT1基因的表达；在各发育时期猪泌尿生殖器官中，高度的组蛋白乙酰化调控着WT1基因的高表达，进而保证了猪泌尿生殖器官的发育、形成以及正常功能的维持。本实验对猪早期胚胎和泌尿生殖器官发育过程中WT1基因表达和组蛋白乙酰化变化的关系做出了系统研究，为以后探索WT1基因的表达模式以及WT1基因和组蛋白乙酰化之间具体的调控机制提供了理论基础和实验依据。
【作者】谭文涛；
【导师】李子义；
【作者基本信息】吉林大学，动物学，2014，硕士
【关键词】WT1基因；组蛋白乙酰化；泌尿生殖器官；早期胚胎；猪；

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